反義寡核苷酸(Antisense Oligonucleotides,ASOs)是一段由15-25個核苷酸組成的靶基因配對的單鏈DNA或RNA序列,它通過特異性阻斷靶基因的轉錄或者翻譯過程,達到基因調控的目的。反義寡核苷酸因具備高度特異性、高效性和安全低毒等優勢,在基因治療等領域展現出了廣闊的應用前景。

近年來,ASOs常被用來開發基因靶向治療藥物。天然的ASOs在體內很容易被降解,特異性低,且有毒副作用。因此,藥物ASOs通常帶有特定的修飾基團,以增強寡核苷酸在體內的穩定性,提高特異性,并降低其毒副作用。

泓迅科技建立了符合ISO9001和ISO13485質量管理要求的生產車間,擁有標準的生產流程,精湛的合成及純化工藝。合成的ASOs均嚴格執行QC檢測標準,通過HPLC純度檢測,以確保高質量的ASOs產品輸出。

服務優勢

  1. 制造能力:ug-g合成規格,滿足您從研發級別到制造級別的需求。
  2. 發貨速度:靈活的項目安排,提供快速的交付周期。
  3. 嚴格質控:在ISO9001和ISO13485質量體系要求下嚴格把控產品質量。
  4. 質量分析:HPLC和LC-Mass分析(對于細胞實驗可提供內毒素和生物負載檢測)。
  5. 專業性強:18年以上經驗豐富的核酸合成專家團隊,提供專業化的技術支持。
  6. 高定制化:可提供豐富的修飾類型和靈活的合成規格。

服務詳情

服務項目 產量 純化方式 修飾類型 發貨形式 周期
反義寡核苷酸
ASOs
研發級別:ug-mg HPLC PTO、2′-F、2′-OME、
2′-MOE、LNA、Cholesterol 、GalNAc等
  • 干粉發貨,根據客戶需求分裝。
  • COA文件
  • 咨詢
    制造級別:g HPLC PTO、2′-F、2′-OME、
    2′-MOE、LNA、Cholesterol、GalNAc等
  • 干粉發貨,根據客戶需求分裝。
  • COA文件
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    *如需其他特殊修飾,請與我們聯系support@synbio-tech.com

    應用方向

    越來越多的研究通過基因沉默反義DNA寡核苷酸來確定RNAi的表型。通常設計15-25個堿基長的ASOs序列與感興趣的mRNA結合,ASOs與靶mRNA特異性雜交,被RNase H內切酶特異性識別,通過干擾蛋白質翻譯來阻斷或抑制基因表達。將含有至少6個堿基的硫代磷酸酯修飾的DNA片段的ASOs與靶mRNA結合并形成的RNA/DNA異源雙鏈體,是細胞內源性RNase H酶消化的底物[1-2]。可用qPCR檢測mRNA水平的降低。

    反義寡核苷酸

    圖1:ASO介導的RNase H抑制基因表達的過程

    除了與靶mRNA特異性雜交外,也可針對 mRNA 5′-非翻譯區設計ASOs,使其翻譯受阻。另外,針對前體 mRNA,還可以在內含子與外顯子剪切位點處設計ASOs,使其不能正常剪切,稱為剪切捕獲 (Splicing arrest),此方法已經成功應用于杜氏肌營養不良的基因治療[3]

    ASO設計原理示意圖

    圖2:ASO設計原理示意圖[3]

    配體-ASO偶聯是ASOs藥物遞送的主要策略。三價N-乙酰半乳糖胺(GalNAc, GN3)是肝細胞表面特異性去唾液酸糖蛋白受體(ASGPR)的高親和性配體,它可使第二代gapmer ASOs在小鼠肝臟中的效能提高6-10倍。相對于MOE修飾ASOs,GalNAc綴合與S-cEt修飾結合,可使ASOs效能提高60倍。GalNAc綴合的ASOs與小鼠ASGPR具有高親和力,可提高ASOs的小鼠肝細胞靶向遞送能力[4]

    參考文獻
    [1]Walder RY and Walder JA.Role of RNase H in hybrid-arrested translation by antisense oligonucleotides. Proc Natl Acad Sci USA, 1988, 85:5011?5015.
    [2]Dagle JM, Walder JA, and Weeks DL. Targeted degradation of mRNA in Xenopus oocytes and embryos directed by modified oligonucleotides: studies of An2 and cyclin in embryogenesis. Nucleic Acids Res, 1990, 18:4751?4757.
    [3]汪小龍,咸靜女,陳剛,彭海波.寡核苷酸藥物及寡核苷酸制備技術研究進展.生物工程學報, 2018, 34(05): 664-675.
    [4]Prakash TP, Graham MJ, Yu JH, etc. Targeted delivery of antisense oligonucleotides tohepatocytes using triantennary N-acetylgalactosamine improves potency 10-fold in mice. Nucleic Acids Res. 2014, 42(13): 8796-807.